Студенческая научная лаборатория кафедры гистологии ДГМА - Лабораториум
 home главная · контакты · форум · книги  
    

Микроскоп люминесцентный МЛ-2
Инструкция к пользованию

ЛОМО, 1965г.

I. НАЗНАЧЕНИЕ

Микроскоп МЛ-2 предназначается для изучения микробиологических, гистологических и других препаратов в свете люминесценции, возбуждаемой сине-фиолетовым участком спектра, а также ультрафиолетовыми лучами с длиной волны до 360 нм.

Наблюдение объектов в свете люминесценции производится при освещении их сверху, через объектив. При этом можно одновременно освещать объекты снизу, используя конденсор темного поля ОИ-13 (не входит в комплект микроскопа) или фазово-контрастное устройство КФ-4.

Микроскоп позволяет также производить исследование объектов в видимой части спектра в проходящем и отраженном свете в темном поле.

Микроскоп дает возможность фотографировать изучаемые препараты на кадр размером 24x36 мм с помощью фотонасадки МФН-10.

Микроскоп нормально работает в помещении с температурой от +10 до +40° С и относительной влажностью не более 80%.

II. ОСНОВНЫЕ ДАННЫЕ

Диапазон возбуждения люминесценции объектов -- 360—440 нм.
Диапазон исследуемой люминесценции объектов -- 400—650 нм.
Увеличение: при визуальном наблюдении -- 53—1350х; при фотографировании -- 20—540х.
Собственное сменное увеличение насадки АУ-26 -- 1,1x; 1,6x и 2,5x.
Апертура конденсора -- 1,2.
Пределы угла поворота столика -- 0—180°
Пределы перемещения столика:
  - в продольном направлении -- 0—40 мм;
  - в поперечном направлении -- 0—60 мм.
Точность отсчета величины перемещения столика -- 0,1 мм.
Точность микрометрической подачи -- 0,002 мм.
Движение столика — крестообразное.
Максимальная высота исследуемого объекта при работе в падающем свете -- 90 мм.
Источник света — ртутная лампа ДРШ-250.

Объективы (ахроматические), расчитанные для тубуса 160 мм:
НаименованиеСистемаСобст. ув., кратЧисл. ап.Фокус. расст., ммРабочее расст., ммВид. поле зр. с ок.5x, мм
Ахромат. 10x0,40 (ОМ-33Л)Сухая100,4015,983,441,30
Ахромат. 20x0,40 (ОМ-27Л)Сухая200,408,401,800,65
Ахромат. 40x0,65 (МЩ-Л)Сухая400,654,350,770,32
Ахромат. 40x0,75 (ОМ-23Л)Водная иммерсия400,754,322,110,32
Ахромат. 70x1,23 (ОМ-25Л)Водная иммерсия701,232,520,370,18
Ахромат. 90x1,25 (ОМ-41Л)Масляная иммерсия901,251,960,320,14

Объективы (ахроматические и эпиобъективы), расчитанные для тубуса 190 мм:
НаименованиеСистемаСобст. ув., кратЧисл. ап.Фокус. расст., ммРабочее расст., ммВид. поле зр. с ок.5x, мм
Ахроматич. 95x1,25Масляная иммерсия951,251,960,110,16
Эпиобъектив 20x0,40Сухая200,408,401,900,75
Эпиобъектив 40x0,65Сухая400,654,590,660,39

Объективы для работы по методу фазового контраста:
НаименованиеСистемаСобст. ув., кратЧисл. ап.Фокус. расст., ммРабочее расст., ммВид. поле зр. с ок.5x, мм
10x0,30-ФЛСухая100,3015,507,771,30
40x0,65-ФЛСухая400,654,350,770,32
90x1,25-ФЛМасляная иммерсия901,251,960,320,14

Примечание. Объективы ФОМ-5Л, Ф-МЩ-Л и Ф-ОМ-41Л пригодны только при комбинированном методе освещения объектов, когда исследования ведутся в свете люминесценции при освещении сверху и по методу фазового контраста при освещении снизу.

III. ПРИНЦИП ДЕЙСТВИЯ И ОПТИЧЕСКАЯ СИСТЕМА

Действие прибора основано на использовании явления флюоресценции препаратов, возникающей под действием лучей определенного спектрального состава. Свет флюоресценции имеет большую длину волны, чем свет, возбуждающий флюоресценцию, и является одним из характерных признаков вещества.

Оптическая схема микроскопа МЛ-2 показана на рис. 1.

Рис.1.Оптическая схема микроскопа
Оптическая система для наблюдения объектов в проходящем свете

Источник света 1 коллектором 2 и зеркалом 3 проектируется в плоскость ирисовой апертурной диафрагмы конденсора 4 и далее линзами конденсора и объектива 5 — в выходной зрачок объектива.

Полевая диафрагма 6 зеркалом 3 и конденсором 4 проектируется на плоскость объекта, который объективом 5 проектируется на предметную плоскость бинокулярной насадки 7.

В качестве конденсора 4 используется фазовоконтрастное устройство КФ-4. Для работы с ним в обычном проходящем свете следует установить отверстие с цифрой «0» в диске конденсора в рабочее положение.

Оптическая система микроскопа рассчитана на объективы для тубуса 190 мм. При использовании объективов, рассчитанных для тубуса 160 мм, для сохранения коррекции системы вводится дополнительная ахроматическая линза 8, которая повышает общее увеличение системы в 1,2 раза.

Оптическая система для наблюдения объектов в свете люминесценции при освещении их сверху и для исследования объектов в темном поле и при смешанном освещении

При освещении объектов сверху в ход лучей включаются зеркало 9 и светоделительная пластинка 10 со специальным покрытием. Эта пластинка преимущественно отражает лучи с длиной волны 360—440 нм и пропускает лучи с длиной волны 440—700 нм.

Источник света 1 проектируется коллектором 2, зеркалом 9 и линзой 11 в плоскость апертурной диафрагмы 12, которая призмой 13, линзами 14, 15, 16 и свето-делительной пластинкой 10 проектируется в выходной зрачок объектива 5. Полевая диафрагма 17 линзами 15, 16, светоделительной пластинкой 10 и объективом 5 проектируется на плоскость объекта. Свет флюоресценции объекта проходит через объектив 5 и свето-делительную пластинку 10 в бинокулярную насадку 7.

Для получения темного поля при работе в отраженном свете вместо светоделительной пластинки 10 включают кольцевое зеркало 18 и диафрагму 19.

Оптическая система позволяет также производить, наблюдение объектов при смешанном освещении, т. е. при сочетании освещения препаратов сверху светом, возбуждающим люминесценцию препарата, с одновременным освещением снизу по методу темного поля или фазового контраста. Разделение светового пучка от источника света осуществляется с помощью светоделительной пластинки 20 со специальным интерференционным покрытием, подобным покрытию светоделительной пластинки 10. Для наблюдения используется бинокулярная насадка 7.

В качестве источника света применяется ртутная лампа, дающая интенсивное излучение в сине-фиолетовой области спектра и в ближней ультрафиолетовой части спектра до длины волны 340 нм.

Для выделения из общего излучения источника света определенных участков спектра в комплекте микроскопа имеется набор светофильтров 21.

Для возбуждения люминесценции ультрафиолетовыми лучами (максимум пропускания при λ = 365 нм) применяются светофильтры из стекла УФС6 толщиной 3 и 5 мм. Кривые пропускания этих фильтров представлены на рис. 2.

Для возбуждения люминесценции сине-фиолетовыми лучами (максимум пропускания при λ = 400 нм) применяются светофильтры из стекла ФС1 толщиной 2 и 4 мм и СС15 толщиной 2 и 2,5 мм. Кривые пропускания этих светофильтров даны на рис. 3.

Светофильтры из стекла УФС6 рекомендуется применять в основном при изучении первичной люминесценции препарата, а также в том случае, когда важно получить в изображении большее разнообразие цветов. При возбуждении люминесценции ультрафиолетовым светом через светофильтр УФС6 в образовании изображения может принять участие весь видимый свет, в то время как при возбуждении сине-фиолетовым светом (λ = 400— 440 нм) в изображении можно наблюдать только зеленоватые, желтые и красные цвета.

Для большинства исследований при изучении вторичной люминесценции флюорохромированных препаратов достаточно использовать для возбуждения светофильтры, пропускающие сине-фиолетовую область спектра.

Все светофильтры, служащие для возбуждения люминесценции препарата, пропускают красные и инфракрасные лучи. Поэтому светофильтры рекомендуется использовать совместно со светофильтрами СЗС14 и СЗС7, кривые пропускания которых даны на рис. 4, или с кюветой, заполняемой 4% раствором медного купороса.

Длительное облучение ультрафиолетовым светом приводит к выцветанию препаратов (особенно, если препарат флюорохромирован). Для предохранения препаратов от выцветания рекомендуется использовать светофильтр из стекла БС8, прозрачный для видимой области и срезающий ультрафиолетовую часть спектра.

Кроме того, в комплект микроскопа входит нейтральный светофильтр из стекла НС 10 и молочное стекло МС13.

Для предохранения светофильтров 21 (рис. 1) от нагрева ртутной лампой предусмотрена кювета 22, которая наполняется дистиллированной водой или раствором медного купороса и устанавливается после коллектора.

Возбуждающие лучи, после того как они прошли препарат и вызвали его свечение, необходимо убрать, иначе возбуждающий свет «забьет» свет люминесценции. Для этого в револьверном диске 23 установлены следующие «запирающие» светофильтры: два светофильтра из стекла ЖСЗ толщиной 2 или 3,5 мм, которые рекомендуется использовать при применении светофильтров из стекла УФС6, и два склеенных светофильтра из стекла ЖС18 толщиной 2 мм и ЖЗС19 толщиной 1 и 0,5 мм, которые рекомендуется использовать при применении светофильтров возбуждения из стекла ФС1 и СС15. Кривые пропускания светофильтров из стекла ЖСЗ показаны на рис. 5, кривые пропускания светофильтров из стекла ЖС18 и ЖЗС19 — на рис. 6.

IV. КОНСТРУКЦИЯ

Рис.7. Общий вид микроскопа

Общий вид микроскопа показан на рис.7. Основными частями микроскопа являются: основание 24 с осветителем, тубусодержатель 25 с револьвером для объективов и механизмом вертикального перемещения препарата, предметный столик 26, кронштейн 27 с конденсором, электропульт 28 типа ПРЛ-5.

Основание с осветителем

Ртутная лампа 29 (рис. 8) крепится на контактах осветителя, как показано на рисунке. Для центрирования лампы служат винты 30 (рис. 7). Коллектор перемещается рукояткой 31 вдоль оптической оси. Полевая ирисовая диафрагма открывается рукояткой 32.

Кювету 22 (рис. 1) с дистиллированной водой или с раствором медного купороса устанавливают на подставку 33 (рис. 8). После установки кюветы защитная втулка 34 должна быть надвинута па оправу коллектора до упора.

Правая рукоятка 35 (рис. 7) и левая рукоятка 36 (рис. 8) предназначены для переключения освещения.

Рис.8. Общий вид микроскопа

При вдвинутых до упора рукоятках исследование препарата проводится в проходящем свете. При выдвинутой левой рукоятке включается светоделительная пластинка 20 (рис. 1) и наблюдение ведется при смешанном освещении; при выдвинутой правой рукоятке включается зеркало 9 и работа производится в отраженном свете в темном поле или при возбуждении люминесценции освещением препарата сверху.

На основании микроскопа имеются винты 37 (рис. 7), с помощью которых осуществляется центрирование изображения полевой диафрагмы 6 (рис. 1), и зажим 38 (рис. 7) для заземления микроскопа.

Тубусодержатель

Тубусодержатель 25 жестко связан с основанием микроскопа; к нему крепятся коробка 39 с механизмами грубого и микрометрического (вертикального) перемещения препарата, револьвер 40 с объективами и бинокулярная насадка 7.

Барашки механизмов грубого и микрометрического перемещения препарата смонтированы на одной оси. Вращением барашка 41 осуществляется грубое перемещение, вращением барашка 42 — тонкая наводка на препарат. Грубое движение стопорится поворотом рукоятки 43.

Объективы для работы в проходящем свете ввинчиваются в револьвер через переходные кольца. Для объективов, которые не входят в комплект микроскопа и приобретаются отдельно, имеются дополнительные переходные кольца. На гнездах револьвера награвированы цифры «1», «2», «3» и «4», позволяющие подобрать для каждого объектива соответствующее гнездо револьвера, при установке в которое расцентрировка системы будет минимальной. Рекомендуется в дальнейшем устанавливать объектив только в выбранное гнездо, запомнив его номер.

Светофильтры 21 (рис. 1) в оправах устанавливаются в специальные гнезда под откидной крышкой 44 (рис.7).

На тубусодержателе расположены барашки для изменения диаметров апертурной и полевой диафрагм при работе в отраженном свете. Барашком 45 (рис. 8) открывается и закрывается апертурная диафрагма, барашком 46 (рис. 7)—полевая диафрагма. Винты 47 предназначены для центрирования полевой диафрагмы при работе в отраженном свете.

Рукояткой 48, расположенной на головке тубусодержателя, осуществляется переключение светоделительной пластинки 10 (рис. 1) и кольцевого зеркала 18.

При работе в проходящем свете с объективами для тубуса 160 мм в оптическую систему включают дополнительно ахроматическую линзу 8, смонтированную на салазках. Линзу включают, выдвигая рукоятку 49 (рис. 7) на себя до упора.

В тубусе размещен револьверный диск 23 с запирающими светофильтрами.

Рис.9. Бинокулярная насадка АУ-26

Бинокулярная насадка (рис. 9) или фотонасадка МФН-10 закрепляется на головке микроскопа с помощью винта 50 (рис. 7). Бинокулярную насадку можно установить в любом положении вокруг вертикальной оси.

Насадка АУ-26 имеет сменные увеличения 2,5х; 1,6х и 1,1х и специальную оптическую систему для рассматривания выходного зрачка объектива. Установка требуемого увеличения насадки производится вращением диска 51 (рис. 9) за накатанную часть. Диск имеет четыре фиксированных положения. На цилиндрической части диска награвировано: «2,5х»; «1,6х»; «1,1х» и «ФК».

Установка окуляров по расстоянию между глазами наблюдателя производится параллельным перемещением окулярных трубок. Одновременно с перемещением окулярных трубок вращается шкала 52, показывающая расстояние между осями окуляров.

Так как при изменении расстояния между окулярными трубками изменяется расчетная длина тубуса, то следует произвести компенсацию длины тубуса подъемом или опусканием окуляров, вращая при этом втулки 53. Втулки со шкалами следует установить на деления, равные делению шкалы 52. Для компенсации ошибки глаза наблюдателя нужно дополнительно перемещать окулярные трубки вверх (для дальнозоркого глаза) или вниз (для близорукого глаза) на соответствующую величину. Значения делений шкалы окулярных трубок в диоптриях даны в таблице.

Близорукость (миопия) и дальнозоркость (гиперметропия) в диоптриях

Величина смещения по шкале диоптрийной подвижки от установленного положения при окуляре 4х в делениях ±1

Величина смещения по шкале диоптрийной подвижки от установленного положения при окуляре 5х в делениях ±2

Предметный столик КС-2

Рис.10, Рис.11. Предметный столик КС-2 и кронштейн с конденсором КФ-4

Столик КС-2 перемещает препарат в двух взаимно-перпендикулярных направлениях. Перемещение препарата осуществляется вращением барашков 54 (рис. 10) и 55, смонтированных в подшипниках на одной оси. На столике препарат закрепляется между держателями 56 и 57 препаратоводителя. Для закрепления препарата держатель 57 отводится за рукоятку; после того как препарат будет поставлен, держатель отпускается. В зависимости от размера препарата держатели могут перемещаться относительно друг друга. Для перемещения держателей необходимо отвинтить винты 58, передвинуть держатели по пазу и затем снова затянуть винты. Отсчет величины перемещения препарата осуществляют по шкалам 59, 60 и нониусам.

Предметный столик можно поворачивать на 180°. Винт 61 служит для фиксации поворота столика, винты 62 — для центрирования столика, т. е. для совмещения оси его вращения с оптической осью микроскопа.

Предметный столик при помощи кронштейна, имеющего паз типа «ласточкин хвост», крепится к направляющей 63 микроскопа и зажимается винтом 64 на любой высоте.

Кронштейн с конденсором

Кронштейн 65 (рис. 11) устанавливается на микроскопе на той же направляющей, что и предметный столик. Установка кронштейна осуществляется следующим образом. Кронштейн ставят на направляющую, опускают вниз до упора и закрепляют винтом 66. Конденсор 4 вставляют в кольцо кронштейна до упора снизу и крепят винтом 67. Вертикальное перемещение конденсора осуществляется вращением барашка 68.

V. МЕТОДИКА РАБОТЫ

Для правильного использования люминесцентного микроскопа МЛ-2 нужно освоить следующие виды его настройки:

1. Настройку для наблюдения объектов при освещении их снизу, через конденсор.
2. Настройку для наблюдения объектов в свете люминесценции при освещении их сверху, через объектив.
3. Настройку для работы по методу фазового контраста и в темном поле.
4. Настройку для работы в отраженном свете в темном поле.
5. Настройку для работы при смешанном освещении.
6. Настройку для работы с посторонним источником света.
7. Настройку для фотографирования.
1. НАСТРОЙКА МИКРОСКОПА ДЛЯ НАБЛЮДЕНИЯ ОБЪЕКТОВ ПРИ ОСВЕЩЕНИИ СНИЗУ, ЧЕРЕЗ КОНДЕНСОР

Установить фазовый конденсор КФ-4 или конденсор с апертурой 1,2.

Ввести в ход лучей отверстие в диске конденсора КФ-4, соответствующее индексу «0».

При работе с объективом 10 x0,40 рекомендуется верхнюю линзу конденсора свинчивать.

Установить насадку МФН-10 или бинокулярную насадку и вставить окуляры. С бинокулярной насадкой следует использовать окуляры 4х или 5х; с окуляром 4х увеличение насадки должно быть 1,6х или 2,5х.

Вставить в револьвер микроскопа объективы требуемого увеличения.

Вывести светоделительную пластинку 10 (рис. 1) из хода лучей, для чего поставить рукоятку 48 (рис. 7) в положение «ТП».

Вывести светоделительную пластинку 20 (рис. 1) и зеркало 9 из хода лучей, задвинув рукоятки 35 (рис. 7) и 36 (рис. 8) в основание.

Перед зажиганием ртутной лампы установить кювету, наполненную дистиллированной водой или раствором медного купороса.

Перед включением микроскопа в сеть заземлить его при помощи зажима 38 (рис. 7) со знаком «┴», расположенного на основании.

Зажечь ртутную лампу, руководствуясь описанием электропульта ПРЛ-5.

Снимать кювету с прибора при включенной лампе или незакрытой предохранительной шторке нельзя. Предохранительная шторка закрывается с помощью рукоятки 69 (рис. 8).

Вращением барашка 68 (рис. 11) поднять конденсор вверх до упора и приложить к апертурной диафрагме лист бумаги, на котором будет видно изображение источника света.

Передвигая коллектор вращением рукоятки 31 (рис. 7), добиться резкого изображения нити источника света на бумаге.

Отцентрировать лампу винтами 30 так, чтобы изображение наиболее яркой части светящегося тела центрично заполняло отверстие апертурной диафрагмы при максимальном ее раскрытии.

Для работы в проходящем свете в комплект микроскопа введен набор светофильтров из стекла ОС11, КС2, НС3, НС10 и ЗС2; светофильтры рекомендуется использовать при освещении объектов снизу, через конденсор.

Включить в ход лучей объектив 10 x0,40.

Поместить на предметный столик исследуемый объект и сфокусировать на него микроскоп.

Закрыть до минимума полевую диафрагму поворотом рукоятки 32 и несколько прикрыть апертурную диафрагму конденсора.

Вращением барашка 68 (рис. 11) установить конденсор по высоте так, чтобы в поле зрения микроскопа были видны одинаково резко полевая диафрагма и объект.

Поворачивая рукоятку 32 (рис. 7), раскрыть полевую диафрагму так, чтобы ее изображение было несколько меньше поля зрения окуляра.

Вращая винты 37, движением зеркала 3 (рис. 1) привести изображение полевой диафрагмы в центр поля зрения окуляра. После этого полевую диафрагму можно раскрыть до размеров поля зрения окуляра (и даже немного больше) и открыть апертурную диафрагму:

Прежде чем приступить к наблюдению объектов, перемещением коллектора с помощью рукоятки 31 (рис. 7) добиться наилучшей освещенности в плоскости объекта.

Во время перерывов в работе в ход лучей рекомендуется включать с помощью рукоятки 69 (рис. 8) шторку для предохранения препаратов от вредного действия светового потока.

Поле зрения микроскопа (даже с объективом 10x0,40) очень невелико по сравнению с площадью препарата, что затрудняет отыскивание необходимого для исследования участка препарата, особенно при больших увеличениях. Поэтому, чтобы не потерять из поля зрения выбранный участок, необходимо соблюдать следующий порядок в работе:

При объективе 10X0,40, окуляре 5х и увеличении 1,1х насадки АУ-26 установить препарат в центр поля зрения микроскопа и только после этого включить в ход лучей объектив большего увеличения.

Сфокусировать микроскоп на препарат и снова настроить освещение, проверяя центричность и резкость изображения полевой диафрагмы и источника света.

При использовании иммерсионных объективов 90x1,25 и 70x1,23 необходимо конденсор поднимать вверх до упора. Изображение полевой диафрагмы в этом случае может быть нерезким.

Примечание. Объектив 10 X0,40 применяется в основном как искатель. Поле зрения микроскопа с таким объективом наибольшее, поэтому он удобен для отыскивания участка препарата, который необходимо исследовать при большом увеличении.

Перед началом работы на фронтальную линзу объектива 90 X1,25 и на препарат нанести по капле нелюминесцирующего иммерсионного масла, а при работе с объективом 70X1,23 — каплю дистиллированной воды. После работы иммерсионное масло с фронтальной линзы объектива и с препарата снять чистой тряпочкой или ватой, а затем протереть их ватой, смоченной спиртом или ксилолом.

Фокусировку микроскопа на препарат следует производить очень осторожно, особенно при работе с иммерсионным объективом. В начале фокусировки, когда в поле зрения еще не видно изображения объекта, апертурную диафрагму конденсора рекомендуется прикрывать, так как при этом увеличивается глубина резкости микроскопа.

При исследовании препарата необходимо правильно, открыть апертурную диафрагму. Открывать апертурную диафрагму следует так, чтобы края ее изображения заходили за оправу последней линзы объектива. Изображение апертурной диафрагмы на последней линзе объектива можно видеть, если включить в ход лучей насадки АУ-26 линзу с гравировкой «ФК». Это изображение легко обнаружить, открыв и закрыв несколько раз апертурную диафрагму.

В том случае, когда требуется получить максимально возможную освещенность в плоскости препарата, нужно полностью открыть апертурную диафрагму, затем включить в ход лучей насадки линзу с требуемым увеличением и приступить к работе.

При использовании объектива 90X1,25 или 70X1,23 на фронтальную линзу конденсора необходимо нанести каплю нелюминесцирующего иммерсионного масла или воды. Апертура конденсора при этом будет 1,2 (вместо единицы). Если освещенность в поле зрения достаточная, рекомендуется прикрывать апертурную диафрагму так, чтобы диаметр ее изображения был приблизительно равен 2/3 диаметра зрачка выхода объектива. При таком раскрытии диафрагмы изображение препарата будет более контрастным, а потому нет необходимости на фронтальную линзу конденсора наносить иммерсионную жидкость при работе с иммерсионными объективами.

2. НАСТРОЙКА МИКРОСКОПА ДЛЯ НАБЛЮДЕНИЯ ОБЪЕКТОВ В СВЕТЕ ЛЮМИНЕСЦЕНЦИИ ПРИ ОСВЕЩЕНИИ ИХ СВЕРХУ, ЧЕРЕЗ ОБЪЕКТИВ

Освещение объектов сверху, через объектив, имеет значительное преимущество перед освещением снизу, через конденсор, в следующих случаях: при работе с сильными объективами с большой апертурой (A = 0,65—1,3), так как при этом значительно повышается яркость изображения; при исследованиях толстых прозрачных и непрозрачных объектов.

Подготовку микроскопа к работе необходимо производить в следующем порядке:

Установить бинокулярную насадку на микроскоп я вставить окуляры. С насадкой АУ-26 следует использовать окуляры 4х и 5x

Вставить в револьвер микроскопа объективы требуемого увеличения.

Установить необходимые светофильтры (в соответствии с указаниями раздела III) в зависимости от изучаемых объектов и применяемых флюорохромов.

Выбрать запирающий светофильтр (в соответствии с указаниями раздела III), включить его в ход лучей, для чего повернуть диск 23 (рис. 1) так, чтобы номер, соответствующий марке светофильтра, был обращен к наблюдателю. Цифра «1» соответствует светофильтру, склеенному из стекла ЖС18 толщиной 2 мм и стекла ЖЗС19 толщиной 1 мм. Цифра «2» соответствует светофильтру, склеенному из стекла ЖС18 толщиной 2 мм и стекла ЖЗС19 толщиной 0,5 мм. Цифра «3» соответствует светофильтру из стекла ЖСЗ толщиной 2 мм. Цифра «4» соответствует светофильтру из стекла ЖСЗ толщиной 3,5 мм.

Ввести в ход лучей светоделительную пластинку 10, для чего поставить рукоятку 48 (рис. 7) в положение «Л».

Вытянув до упора рукоятку 35, ввести в ход лучей зеркало 9 (рис. 1).

Зажечь ртутную лампу 29 (рис. 8) в соответствии с указаниями в описании пульта ПРЛ-5.

Поворотом револьвера 40 (рис. 7) ввести в ход лучей свободное отверстие револьвера, не занятое объективом.

Положив на столик лист бумаги, наблюдать на бумаге изображение источника света.

Передвигая коллектор вращением рукоятки 31, добиться резкого изображения источника света на бумаге.

Отцентрировать винтами 30 лампу так, чтобы изображение наиболее яркой части светящегося тела лампы находилось в центре отверстия револьвера.

Поворотом револьвера 40 ввести в ход лучей объектив малого увеличения.

Поместить на предметный столик исследуемый объект и сфокусировать на него микроскоп.

Поворотом рукоятки 32 полностью открыть полевую диафрагму 6 (рис. 1) и поворотом барашка 46 (рис. 7) закрыть полевую диафрагму 17 (рис. 1) до минимальных размеров.

Вращением барашка 45 (рис. 8) несколько приоткрыть апертурную диафрагму 12 (рис. 1) и отцентрировать полевую диафрагму 17 винтами 47 (рис. 7) так, чтобы ее изображение было в центре поля зрения окуляра.

Барашком 46 открыть полевую диафрагму, при этом изображение ее диаметра должно соответствовать диаметру полевой диафрагмы окуляра.

При работе с эпиобъективами 21 x0,40-Л и 40 x0,65-Л апертурную диафрагму следует открывать полностью, а при работе с объективами, рассчитанными для тубуса 160 мм, и объективом 95x1,25-Л — по зрачку, как указано в предыдущем разделе. За зрачком объектива наблюдать с помощью насадки АУ-26 при включенной линзе с гравировкой «ФК»- После настройки освещения установить требуемое увеличение насадки.

Приступить к работе на микроскопе, добиваясь наилучшей освещенности объекта перемещением коллектора с помощью рукоятки 31.

Для предохранения препаратов от действия света во время перерывов в работе в ход лучей включать предохранительную шторку с помощью рукоятки 69 (рис. 8).

При переходе от объектива с меньшим увеличением к объективу с большим увеличением необходимо соблюдать последовательность, указанную в предыдущем разделе.

3. НАСТРОЙКА МИКРОСКОПА ДЛЯ РАБОТЫ С ОСВЕЩЕНИЕМ. ПО МЕТОДУ ФАЗОВОГО КОНТРАСТА И ТЕМНОГО ПОЛЯ

При работе на микроскопе с фазовоконтрастным устройством рекомендуется пользоваться насадкой МФН-10. Настройку микроскопа в этом случае следует производить с помощью вспомогательного микроскопа МИР-4, руководствуясь описанием фазовоконтрастного устройства КФ-4.

При исследованиях должны быть использованы объективы для работы по методу фазового контраста.

Для освещения препаратов по методу темного поля необходимо использовать конденсор ОИ-13.

Настроив микроскоп для работы в проходящем свете, настроить освещение для работы в темном поле, руководствуясь описанием конденсора ОИ-13.

4. НАСТРОЙКА МИКРОСКОПА ДЛЯ РАБОТЫ В ОТРАЖЕННОМ СВЕТЕ В ТЕМНОМ ПОЛЕ
Рис.12. Настройка для отраженного света и темного поля

Для работы в отраженном свете в темном поле необходимо настроить микроскоп так, как указано в разделе 2. Отличие состоит только в том, что поворотом диска 23 (рис. 1) выключают запирающий светофильтр и взамен светоделительной пластинки 10, поставив рукоятку 48 (рис. 7) в положение «ТП», включают кольцевое зеркало 18 (рис. 1). Полевую и апертурную диафрагмы следует полностью открыть.

При работе в отраженном свете часто приходится исследовать большие по высоте и объему объекты. В этом случае целесообразно столик отпустить вниз (насколько это необходимо по условиям фокусировки), как показано на рис. 12.

5. НАСТРОЙКА МИКРОСКОПА ДЛЯ РАБОТЫ ПРИ СМЕШАННОМ ОСВЕЩЕНИИ

Для работы при смешанном освещении, т. е. при одновременном освещении препарата проходящим и отраженным светом, необходимо включить в ход лучей светоделительную пластинку 20 (рис. 1), выдвинув левую рукоятку 36 (рис. 8). Эта пластинка имеет интерференционное покрытие; она отражает сине-фиолетовые лучи в систему отраженного света и пропускает желто-зеленые лучи в систему проходящего света. Выбор вида освещения производится самим исследователем в зависимости от характера объектов.

При работе с фазовоконтрастным устройством КФ-4 или с конденсором темного поля ОИ-13 одновременно можно освещать объект сверху, возбуждая при этом люминесценцию объекта. Настройку освещения следует производить последовательно, руководствуясь указаниями разделов 2 и 3.

Для работы в проходящем свете применяются светофильтры из стекла СС15, ОС11, КС2, НС3, НС10 и ЗС2, которые рекомендуется использовать при одновременном наблюдении объекта в свете люминесценции и по методу фазового контраста. При этом под конденсор устанавливается светофильтр, цвет которого отличается от цвета светофильтра, возбуждающего люминесценцию.

6. НАСТРОЙКА МИКРОСКОПА ДЛЯ РАБОТЫ С ПОСТОРОННИМ ИСТОЧНИКОМ СВЕТА

В некоторых случаях можно работать на микроскопе при освещении объекта посторонним источником света, например осветителями ОИ-19 и ОИ-24. Для этого необходимо:

Установить на основание микроскопа зеркало 70 (рис. 8), входящее в комплект микроскопа.

Установить осветитель ОИ-19 или ОИ-24 слева или справа от микроскопа. Свет от осветителя направить на зеркало.

Произвести настройку освещения, руководствуясь описанием осветителя, и приступить к работе.

Рекомендуется также использовать осветитель ОИ-19 или ОИ-24 при одновременном наблюдении объекта в свете люминесценции и по методу фазового контраста.

7. НАСТРОЙКА МИКРОСКОПА ДЛЯ ФОТОГРАФИРОВАНИЯ
Настройка микроскопа для фотографирования

Для фотографирования объекта взамен бинокулярной насадки 7 (рис. 7) установить на микроскоп монокулярную фотонасадку МФН-10 (рис. 13) и закрепить ее винтом 50 (рис. 7).

В верхнее отверстие корпуса 71 (рис. 13) насадки до установки фототубуса 72 вставить один из прилагаемых к насадке гомалей 3х или 5х, либо фотоокуляр вместе с переходной втулкой.

Установить фототубус и закрепить его винтом 73.

Установить сверху тубуса фотокамеру и закрепить ее на резьбе поворотом вокруг вертикальной оси.

Вставить окуляр 8х (АМ-8) с сеткой в визуальную трубку 74 насадки.

Вращением оправы глазной линзы окуляра добиться отчетливого изображения биштрихов сетки.

После предварительной подготовки микроскопа к фотографированию, не сбивая диоптрийной установки окуляра в визуальной трубке, дальнейшую фокусировку микроскопа на объект следует производить грубым и тонким перемещением предметного столика.

Получив резкое изображение объекта в поле зрения окуляра, рукояткой 75 вывести призму из хода лучей.

Установив по шкале фотокамеры «Зоркий-4» необходимую экспозицию, завести затвор и производить фотографирование.

8. РАБОТА С ЦЕНТРИРОВОЧНОЙ ПЛАСТИНКОЙ

Прикладываемая к микроскопу центрировочная пластинка служит для быстрого совмещения оси вращения столика с осью тубуса. На ярлыке пластинки записаны координаты совмещения перекрестия пластинки с осью вращения столика.

Центрировочную пластинку следует устанавливать в препаратодержателе так, чтобы ярлык пластинки находился у поворотной лапки препаратодержателя. В этом положении другую лапку препаратодержателя совместить строго с риской шкалы. Вращая барашки 54 (рис. 10) и 55, установить отсчеты по шкалам столика согласно координатам, указанным на ярлыке пластинки.

Для наблюдения перекрестия центрировочной пластинки рекомендуется в ход лучей включить слабый объектив 10X0,40, в тубусы насадки вставить окуляры 5х и включить увеличение 1,1х.

Далее настроить освещение и сфокусировать микроскоп на верхнюю поверхность пластинки. Затем центрировочными винтами 62 привести центр перекрестия пластинки в центр поля зрения окуляра. Наблюдая в окуляр, повернуть верхнюю часть столика на 180° и заметить положение окружности, которую описывает перекрестие пластинки при повороте столика.

Координатным механизмом столика совместить перекрестие окуляра с центром окружности и снова повернуть столик на 180°. Если после этого центр перекрестия пластинки при повороте столика вращается на одной точке (не описывает окружности), то это значит, что перекрестие совмещено с осью вращения столика. Если изображение перекрестия пластинки не совпадает с перекрестием окуляра, вращением винтов 62 снова совместить перекрестие пластинки с перекрестием окуляра.

На этом приведение оси вращения столика на центр поля зрения микроскопа заканчивается. Это положение столика является исходным, и при дальнейшей работе центрировочными винтами 62 пользоваться нельзя, так как будет нарушено исходное положение столика. Для перемещения препарата нужно пользоваться барашками 54 и 55.

Если необходимо зафиксировать положение объекта с тем, чтобы его можно было вторично легко отыскать, на предметном стекле препарата следует записать координаты по отсчетам на шкалах столика при совмещении объекта с центром перекрестия окуляра. При такой фиксации координат на предметном стекле препарата: всегда можно быстро ввести в поле зрения тот участок, объекта, который вызывает интерес. Для этого необходимо:

Установить центрировочную пластинку на столик; микроскопа.
Установить отсчет по шкалам столика согласно координатам, записанным на пластинке.
Винтами 62 совместить изображение перекрестия: пластинки с перекрестием окуляра или привести его в центр поля зрения.
Поставить препарат вместо центрировочной пластинки.
Установить по шкалам столика координаты, указанные на предметном стекле препарата. При этом в поле зрения должен находиться участок объекта, вызывающий интерес исследователя.

VI. УХОД ЗА ПРИБОРОМ

Микроскоп необходимо содержать в чистоте и предохранять от механических повреждений.

Особое внимание следует обращать на чистоту оптических деталей. Пыль с оптических поверхностей нужно смахивать беличьей кисточкой, а жировые налеты удалять мягкой батистовой тряпочкой или ватой, слегка смоченной чистым бензином или ксилолом. Особенно осторожно надо чистить зеркала, имеющие наружные покрытия; рекомендуется осевшую пыль сдувать резиновой грушей.

Чистку оптики необходимо производить без разборки узлов микроскопа, так как разборка приведет к разъюстировке микроскопа.

Микроскоп выпускается смазанным. Если через некоторое время смазка в направляющих грубого движения микроскопа или в подвижной части столика сильно загустеет, ее нужно смыть ксилолом или бензином, вытереть насухо трущиеся поверхности, затем слегка смазать их смазкой, входящей в комплект микроскопа.

В нерабочее время с микроскопа следует снять принадлежности и уложить их в футляры.

Все отверстия в микроскопе нужно закрывать крышками, имеющимися в комплекте, а сам микроскоп накрывать чехлом.

См. также: Осветитель люминесцентный ОИ-18А; Фазово-контрастное устройство КФ-4.

Комментарии

Ваши сообщения, дополнения, отзывы, объявления.
Внимание спамерам: все ссылки публикуются через редирект (рефер) и не индексируются!
Ваш ip адрес записан: 54.92.180.46

Александр
93.80.57.39
16-06-2015
куплю
 Куплю микроскоп МЛ-2 по приемлемой цене.
Пишите на почту
alex.klepnev@gmail.com
Andrey GREEN
91.78.236.181
03-11-2016
Куплю МБИ-11 МБС-9 МБС-10 (себе!)
 Куплю МБИ-11 МБС-9 МБС-10 (себе!)
Куплю в Москве, или при наличии рекомендаций - в других городах.
МБИ-11, МЛ2, Бимам Р-1 , Бимам Р-13, Люмам
Спасибо.
Гарантия оплаты 100%. Предоставлю рекомендации о себе.
почта
green2000 саба ка mail.ru
 
  для других приборов - пользуйтесь нашим форумом).
Оставьте Ваши контактные данные здесь:
 
 © 2008-2016, Laboratorium.dp.ua — документация на лабораторное оборудование. © Dr. Andy  
 
 

Авторство

Днепропетровская государственная медицинская академия, кафедра гистологии.
Адрес: 49005, Днепропетровск, ул. Севастопольская, 17 (морфологический корпус ДГМА).
info контактная информация, написать сообщение
Key words: laboratory equipment, microscopy histology, biology.   Ключевые слова: лаборатория, методики, техника, реактивы, описание приборов, инструкции, паспорт, медицина, биология, гистологические исследования, микроскопы.
в каталоге DMOZ! Rambler's Top100