|
Красители / растворители / спирты для любителей (купить)
Фиксация, проводка, заливка, микротомирование, окрашивание, заключение.
Модератор: Andrew
dennisua » 13 мар 2011, 22:47
Еще раз перечитал сообщение Dr.Andy
admin писал(а):У нас на кафедре (ДГМА) мы одно время вместо стандартного ксилола просветляли обезвоженные образцы кедровым маслом (советским еще, иммерсионным) - одно удовольствие работать! И запах потрясающий (особенно в контрасте с ксилолом и хлороформом), и не нужно 99% этанол использовать, и сразу в парафин можно погружать (только перемешивать и сменять чаще нужно).
Т.е. его используют ДО парафина, а парафин все равно надо будет растворять ксилолом.
-
dennisua
-
-
Сообщения: 38
-
Зарегистрирован: 11 мар 2011, 15:33
admin » 13 мар 2011, 22:56
Верно. Ксилол (или тот же толуол) впоследствии применяется уже при окрашивании. Точнее - на этапе депарафинизации срезов, а также перед заключением в бальзам.
Назрела, видимо, необходимость привести здесь методику приготовления срезов, с момента взятия материала до получения готовых гистологических срезов.
Кто возьмется, коллеги?..
P.S. в литературе все описано.
--
С уважением,
Dr. Andy
-
admin
- Site Admin
-
-
Сообщения: 99
-
Зарегистрирован: 15 май 2009, 02:29
-
Откуда: Днепропетровск
-
dennisua » 13 мар 2011, 23:25
Ну методика описана во многих местах в интернете. Собственно я ее несколько раз читал-смотрел. Больше всего мне понравилось вот это
http://www.youtube.com/watch?v=TLm37BbR1mo
Немного запутался в процедурах, и меня просто сбила фраза, что масло можно использовать вместо ксилола.
Кстати, получил стеклянный нож, обломав стеклянную полоску, подложив под нее зубочистку, сместив ее при этом на пару миллиметров дальше дорожки, намеченной стеклорезом. Получился немного вогнутый нож. Сижу теперь пробую им парафин резать, запихнув парафиновый блок в стеклянную пластинку с отверстием (заготовка для будущего микротома) и отмеряя толщину листиками бумаги и фольги. Пока парафиновые срезы заворачиваются в трубочки. Надо придумать как их сразу в воду помещать, чтобы не закручивались.
Подскажите, а у абсолютизированного изопропилового спирта есть какое-нибудь применение в гистологии? И у смеси эфира и спирта (им оптику еще чистят)?
-
dennisua
-
-
Сообщения: 38
-
Зарегистрирован: 11 мар 2011, 15:33
Melar » 13 мар 2011, 23:40
смесь эфира со спиртом-лучшее, что есть для протирки и промывки оптики ,также в нем хранят предметные стекла после чистки хромпиком и гидрокарбонатом
-
Melar
-
-
Сообщения: 81
-
Зарегистрирован: 22 май 2010, 20:54
dennisua » 14 мар 2011, 12:20
Подскажите, есть ли разница между ксилолом и орто-ксилолом. Для депарафинизации все равно что использовать?
И еще, что означает аббревиатура МБЦ.
-
dennisua
-
-
Сообщения: 38
-
Зарегистрирован: 11 мар 2011, 15:33
Melar » 14 мар 2011, 17:20
курим химическую литературу-ксилол-это просто смесь изомеров, ортоксилола ,метаксилола и параксилола ,лучше взять орта
-
Melar
-
-
Сообщения: 81
-
Зарегистрирован: 22 май 2010, 20:54
dennisua » 14 мар 2011, 17:33
Соответствующий раздел курил! Но он не ответил на мой вопрос о преимуществах/недостатках конкретного изомера перед смесью оных.
-
dennisua
-
-
Сообщения: 38
-
Зарегистрирован: 11 мар 2011, 15:33
dennisua » 16 мар 2011, 20:56
Нашел интересный ресурс с готовыми красителями и лабораторными принадлежностями
http://www.brunelmicroscopes.co.uk/chemicals.html
Но к нам растворители-спирты не шлют. Что интересно у них можно купить Толуол, который у нас таки оказался перкурсором!
Нашел в Киеве фирму Хотэй, которая продает биохимию в разумных количествах. Купил у них агар, краситель по Романовскому и ксилол.
Осталось выклянчить формалин у медиков. Так как в спирте у меня фиксация приводит к сжатию образцов.
-
dennisua
-
-
Сообщения: 38
-
Зарегистрирован: 11 мар 2011, 15:33
admin » 26 мар 2011, 14:50
Неужели в стольном Киеве дела с реактивами хуже, чем в Днепре?.. Мы тут еще перебираем 2-3 фирмы по качеству ксилола (в плане содержания воды), по цене чистого формалина (40% альдегид, емнип).
Ищите лучше.
За реактивами посылаем студентов, еще никого не "забрали". Про вредности рассказываем заранее (например, что перенося 10 литровый бутыль с этиловым эфиром или с "дымящейся" соляной кислотой — по учебному корпусу во время сессии — нужно быть осторожным ) Спирт этиловый дети хирургов приносят, также литров по 5-10, не мелочась перед сессией.
И еще, кедровое масло пока оставьте, для ароматизации помещения. Начните с "простого" - с классики. Парафин еще нужно приготовить - прогреть до 200°C (не дома! под вытяжкой!) и "настоять" в термостате при 56° с воском (освященная церковная свеча подойдет)
Где достать раствор по Гимза - уже не знаю, - у нас его еще литров 10 осталось, концентрата…
Это еще один довод к "пройтись по лабораториям" ВУЗов и больниц. Они же где-то его покупают?
Успехов. Очень ждем Ваших микрофотографий.
--
С уважением,
Dr. Andy
-
admin
- Site Admin
-
-
Сообщения: 99
-
Зарегистрирован: 15 май 2009, 02:29
-
Откуда: Днепропетровск
-
Melar » 26 мар 2011, 18:39
ужос, 10 литров-это ж смерть всему живому, а если уронит а на Украине эфир не прекурсор?
-
Melar
-
-
Сообщения: 81
-
Зарегистрирован: 22 май 2010, 20:54
Вернуться в Гистологические методики
|
|