Студенческая научная лаборатория кафедры гистологии ДГМА - Laboratorium - Лабораториум
 home главная · контакты · книги  

Приготовление фиксаторов

Фиксация, проводка, заливка, микротомирование, окрашивание, заключение.

Модератор: Andrew

Приготовление фиксаторов

Сообщение admin » 25 фев 2010, 11:09

Прописи используются в нашей лаборатории.

Фиксатор Буэна
50 мл формалина,
150 мл насыщенной пикриновой кислоты,
10 мл уксусной кислоты (добавить перед употреблением).
Хранится 2-24 ч (до нескольких дней).
После фиксации: 2-3 раза промывают в 70°...80° спирте. Затем 96°, 100° - 12-24 ч (при толщине меньше 1 мм до 4 ч). 2 раза в чистый хлороформ (до опускания), смесь хлороформ-парафин, парафин (1 мм -1ч, 10 мм - 24 ч).
[фиксатор кислый, для последующего иммуногистологического исследования не подходит]

Фиксатор Карнуа
(лучше при низких температурах 3-5°С, время удлиняется в 4 - 5 раз)
60 мл абсолютного спирта,
30 мл хлороформа,
10 мл уксусной кислоты.
За 4 ч проникает на 3 мм, 1 мм - 1 ч, 3-5 мм - 3-5 ч.
Не передерживать!!! Переносить в чистый абсолютный спирт.

10% формалин
Развести чистый формалин 1:9 (водопроводная вода).
Скорость фиксации: 0,5 см - до 48 ч при комнатной температуре.
Промывать в водопроводной воде от нескольких часов до нескольких дней.
Начинать обезвоживание с 50°спирта (50° и 60° спирт: 5 мм - 2ч).
Рекомендуется использовать фосфатный буфер для приготовления нейтрального раствора.

Жидкость Бэкера
Развести формалин 1:9 (10 мм : 90 мл) + 1 г хлорида кальция (СаСl2).
Фиксация 16 - 24 ч.
Для липидов: перенести в 3% раствор K2Cr2O7 (24-48 ч), обезводить в трех порциях ацетона по 30 мин, перенести в расплавленный парафин.

---
С уважением,
Dr. Andy
Аватара пользователя
admin
Site Admin
 
Сообщения: 99
Зарегистрирован: 15 май 2009, 02:29
Откуда: Днепропетровск

Re: Приготовление фиксаторов

Сообщение Anastasiya » 15 апр 2010, 23:14

Без разницы, какой фиксатор применять при изготовлении препарата или есть предпочтение определенного фиксатора для определённых тканей?
Anastasiya
 
Сообщения: 1
Зарегистрирован: 15 апр 2010, 22:54

Re: Приготовление фиксаторов

Сообщение Andrew » 25 сен 2010, 12:34

Для разных органов и тканей используются различные фиксаторы.
На вторую часть твоего вопроса, Настя, нельзя ответить однозначно и кратко.
Видимо поэтому он остался здесь без ответа.

Советую начать с этого руководства: Микроскопическая техника / под ред. Г.И.Роскина. - М., "Советская наука". - 1957. Раздел 5 - Фиксация и фиксаторы (стр.93).
--
Удачи.
Andrew
 
Сообщения: 3
Зарегистрирован: 25 сен 2010, 11:50
Откуда: Киев


Вернуться в Гистологические методики

 © 2009-2015, Laboratorium.dp.ua - лабораторное оборудование. © Dr. Andy  
 
 
Авторство: Днепропетровская государственная медицинская академия, кафедра гистологии.
Адрес: 49005, Днепропетровск, ул.Севастопольская, 17 (морфологический корпус ДГМА).
[ home контактная информация, оставить сообщение ]
Rambler's Top100
 
cron